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  • IAA研究NMT標準化方案

    IAA研究NMT標準化方案

     

    一、視頻資源

    二、參考文獻

    三、常測哪些指標

    H+、IAA

    四、檢測這些離子流、分子流,有什么生物學意義

    • 1)H+、IAA生理功能概述

      2)科研案例

      案例1

             為了探究JA影響根系生長的生理和分子機制,利用NMT技術研究了擬南芥Col-0、coi1-1突變體根尖區域生長素和質子流速的影響。Col-0植物根部IAA外排流速的峰值出現在根尖300 μm處,在伸長區和成熟區IAA內流。coi1-1的 IAA流速與Col-0幼苗相似。外源50 μm MeJA處理Col-0和coi1-1的幼苗根系時,過渡區IAA外排速率明顯受到抑制,而在伸長區和成熟區IAA流速沒有顯著差異。相反,在coi1-1幼苗根上,MeJA處理對 IAA流速沒有影響。為了探討IAA流速是否與PM H+-ATPase有關,進一步監測了釩酸鹽預處理Col-0根系的 IAA流速, 發現IAA外排沿著這些根增加,最顯著的區域是分生區和過渡區。幼苗根系的跨膜H+流速與IAA相反,在分生區和過渡區H+內流。然而,在伸長區和成熟區,H+外排。釩酸鹽處理增加了Col-0根分生區和過渡區的H+內流。coi1-1根的H+流速與Col-0相似。外源MeJA顯著增加H+分泌,最顯著的區域是過渡區。外源MeJA對coi1-1根系的凈H+流速沒有顯著影響。結合基因表達水平等實驗結果,表明JA信號可能通過調節關鍵基因的表達來調節生長素信號通路。

      Yan S et al. MeJA Affects Root Growth by Modulation of Transmembrane Auxin Flux in the Transition Zone. Journal of Plant Growth Regulation, 2016, 35(1):256-265.

       

      IAAyanjiu1

      案例2

             為了研究蟲害后植物生長速率降低的潛在機制,使用小菜蛾取食擬南芥葉片,利用NMT技術研究小菜蛾取食擬南芥葉片后根尖IAA和H+流速。結果顯示,在靠近根系表面過渡區的地方,凈IAA流速在蟲害后降低(Fig.3)。相反,昆蟲取食引起了根表面H+凈流速的增加,其中最顯著的反應發生在過渡區(Fig.4)。結果結果表明,蟲害后植物的的生長減少可能與生長素流速和質子分泌減少有關。

      Yan S et al. Insect Herbivory of Leaves Affects the Auxin Flux Along Root Apices in Arabidopsis thaliana. Journal of Plant Growth Regulation, 2017.)

      IAAyanjiu2

      IAAyanjiu3

    五、可以檢測哪些樣品

    點擊查看具體信息

    點擊查看樣品照片

     

    1、動物樣品

    1)細胞

    神經細胞、腫瘤細胞、巨噬細胞、淋巴細胞等

    2)組織器官

    腫瘤、皮膚、胃粘膜、胰島、腦(海馬體等)、胚胎(大鼠、魚)、斑馬魚皮膚/、耳蝸、心臟(香螺)、卵(魚、雞蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉組織(肌纖維、心?。?/p>

    3)其它動物樣品

    珊瑚、螨蟲、昆蟲(果蠅幼蟲的腸、蟑螂血腦屏障、按蚊、長紅錐蝽)、蝌蚪、水蛭、藍蟹(微感毛)、變形蟲、水絲蚓

    2、植物樣品

    1)營養器官

    根:、根毛、根瘤*

    莖:邊材、心材、微管形成層、木質部

    葉:表皮細胞、葉肉細胞、鹽腺細胞、保衛細胞

    2)生殖器官

    花:花瓣、花瓣表皮細胞、花粉

    種子:整體、胚

    果實:果殼、果皮、果肉(蘋果、柑橘)、籽粒、棉花纖維、棉桃

    3)細胞:植物懸浮細胞、液泡

    4)愈傷組織

    3、微生物樣品

    酵母細胞、菌絲、菌落、微藻、細菌(大腸桿菌)

    4、其它生物樣品

    周叢生物

    5、非生物樣品

    金屬、混凝土、泥沙、納米材料、生物醫藥材料

    六、樣品需要做哪些前處理

    國際領先的非損傷微測技術最大的特點就是活體、無損檢測,因此動植物材料在檢測前,不需要任何的液氮速凍、染色、研磨處理等。

    1、動物單細胞

    因NMT是活體檢測,故從培養箱中拿出來后,置于培養皿中,直接檢測即可。

    2、動物組織

    因NMT是活體檢測,無需提前處理。如檢測部位天然暴露在外,如斑馬魚皮膚離子細胞、側線毛細胞,直接檢測即可。如檢測部位位于體內,需在檢測時暴露出檢測部位(可采用麻醉的方式),后檢測即可。

    3、植物根莖葉等組織器官

    天然暴露在外的組織器官,例如根、莖、葉的表面,無需任何處理,直接檢測即可。水培、土培、砂培、平板培養均可。

    4、植物原生質體/液泡

    因NMT是基于微傳感器/探針的非損傷檢測,檢測時不接觸樣品,故原生質體、液泡需要從組織或者細胞中,提取出來后檢測。

    5、植物葉片的表皮細胞、葉肉細胞、鹽腺細胞、保衛細胞

    無需提前處理。因這些細胞處于組織內部,故檢測時采用撕取等方式,暴露出相應細胞即可。

    6、植物花粉管

    離體萌發:在培養皿中萌發一段時間后即可直接檢測;在體萌發:將柱頭置于培養皿中,待萌發一段時間后即可直接檢測。

    7、植物果實

    無需提前處理。如待測部位位于果實內部,需在檢測前暴露出相應部位即可。

    8、植物懸浮細胞

    無需提前處理。檢測時,置于培養皿中檢測即可。

    七、有哪些檢測方式?

    1、實時處理 /瞬時處理后檢測

    即瞬時處理,是指在檢測過程中,在正常測試液中瞬間加入所需的干旱脅迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的處理方法,目的是為了觀察瞬間干旱脅迫下,樣品短時間內的離子/分子的變化趨勢,即短時效應。

    2、預處理/提前處理好后檢測

    是指在干旱脅迫一段較長的時間后(數十分鐘/數小時/數天),觀察植物離子/分子進出的情況,即長時效應。

    八、檢測環境是空氣還是溶液

    檢測時,只要求待測部位浸于溶液中(無需整體都浸在溶液里)。

    九、樣品是如何檢測的

    十、可以送樣檢測嗎

    可以送樣檢測。目前非損傷微測技術測試服務由中關村NMT產業聯盟統籌管理,由遍布全國的25家NMT創新平臺服務中心,提供檢測服務。點擊獲取測試服務

    Ceshifuwuwangluo

    十一、哪里能獲取非損傷微測系統操作培訓服務

    請直接聯系旭月公司獲取設備操作培訓服務。點擊此處查看培訓服務介紹

    聯系人:巨肖宇

    電話:010-8262 2628按3

    十二、如何購買實驗耗材(自行檢測)

    友情鏈接:

     

    中關村NMT產業聯盟 younger xbi wsi10 lmtx bjgxdxsjycyxxw

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    總公司地址:北京市海淀區彩和坊路10號1號樓(1+1大廈)8層808

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